CalFectinTM DNA转染试剂是在磷酸钙转染试剂的基础上高度优化和改良后的转染试剂。具有钙浓度更低，毒性更弱，转染效率更高等特点。细胞培养液中的血清和抗生素不影响转染。相比于Liposome 和 Polymer ，CalFectinTM 在常见的哺乳动物贴壁细胞中，如 HepG2、HEK293、CHO、Hela、MDCK、COS、3T3、LNcap、C6、PC12和原代细胞，具有更高的转染效率。

一、通用转染步骤

1、转染前一天（18h~24h）将细胞接种于24孔板，使第二天转染时细胞达到70%满。

注意：此例以24孔板为例，对于其他类型的细胞培养板/皿，请参考表1。

2、转染前30~60 min，去除原培养液，换新鲜完全培养液（含血清和抗生素）。

3、对于每一个孔，取一无菌的1.5ml离心管，向其中加入50ul不含血清（serum-free）的DMEM（High Glucose），再加入0.5ug质粒DNA，轻柔涡旋震荡或上下颠倒混匀。

4、直接向每支离心管中加入1.5ul的转染试剂，上下颠倒三四次混匀。

注意： 不要使用Opti-MEM稀释转染试剂，会影响转染效率

5、室温放置10-15min。

注意：室温放置最长时间不要超过20min。

6、将CalFectinTM/DNA混合物逐滴加入到24孔板中的一个孔中，轻轻晃动混匀。放入培养箱。

7、12h~18h后，去除转染培养液，换新鲜完全培养液。

8、转染后24h~48h检测转染效率（将转染试剂加入到孔中时间记为0h）。