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(SH1001)shRNA GFP

产品编号: SH1001

产品规格: 3ml,≥10^8TU


  

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  • (SH1001)shRNA GFP 说明书

    产品描述

    慢病毒载体包装的绿色荧光蛋白(Lentiviral shRNA constructs targeting green fluorescence protein,shRNA GFP)。

    绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)最早是由下村修等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色荧光。此后,经过研究者的不断改良,形成了现在荧光极其稳定的GFP。

    将GFP与其他蛋白融合,形成融合蛋白,从而可用于分子标记,药物筛选,信号转导等研究中。慢病毒shRNA GFP因不会对细胞其他基因造成影响,故在实验中,通过感染慢病毒shRNA GFP建立的细胞株通常被用作对照组(Control)细胞。

     

    保存条件
    -80℃保存,1年有效; 20℃保存, 1-2 个月内有效; 4°C保存,1周内有效。

  • 组分和使用说明

    本产品的滴度≥108TU。

    1、将细胞均匀等量地种在60 mm培养皿,一个作为对照(培养皿1),一个用以感染病毒(培养皿2),每个皿3 ml细胞培养液;

    2、当培养皿中细胞长至约80%密度时,吸去培养液,培养皿1换上2.5 ml新鲜培养液,培养皿2换上1 ml新鲜培养液并加入1.5 ml病毒液,同时加入8 mg/ml Polybrene以提高病毒感染效率;

    3、24 h后重复步骤2;

    4、第二次感染病毒24 h后,两个培养皿均分别加入2 mg/ml Puromycin保持48 h以筛选感染成功的细胞,显微镜下观察两个培养皿中死亡细胞情况,通常培养皿1中细胞几乎全部杀死,而培养皿2中只部分杀死或未被杀死。

    移去培养皿2中含死细胞的培养液,加入新鲜培养液培养。待存活的细胞长起来后,转移至培养瓶进一步扩大培养,作为对照组细胞用于实验。

  • 注意事项

    1、避免反复冻融,反复冻融会降低病毒滴度。病毒融解后,如果在一周内使用,可以放置于4℃。如果-80℃保存时间超过一年,可能会导致滴度下降,此时建议加大病毒感染量或感染次数。

    2、慢病毒相关实验请在生物安全柜(BL-2级别)内操作。

    3、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    4、为了您的安全和健康,操作病毒时请穿实验服,佩戴口罩和手套,尽量不要裸露双手及手臂的皮肤。

    5、操作病毒时特别小心病毒溅出。如果操作时超净工作台有病毒污染,请立即用 70%乙醇加1%的SDS溶液擦拭干净。接触过病毒的枪头、离心管、培养板、培养液请于84消毒液浸泡后统一处理。

    6、如需要离心,应使用密封性好的离心管,如有必要请用封口膜封口后离心。

    7、病毒相关的废弃物需要特殊收集,统一经高温灭菌处理。