您好,欢迎进入南京善本生物科技有限公司官方网站!        登录   免费注册   产品订购:sales@sciben.com       support@sciben.com 邮箱登录
您现在的位置:首页 >> 产品中心 >> 产品详细页

(P001A)Sciben SDS-PAGE凝胶快速制备试剂盒

产品编号: P001A

产品规格: 50P


  

  • 产品详细介绍
  • 组份&说明
  • FaQ
  • 推荐配套产品
  • (P001A)SDS-PAGE凝胶试剂盒-说明书

    产品描述

    本产品包括SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶制备所需的全套试剂,只需自备蒸馏水,即可快速制备高质量各种浓度的变性PAGE凝胶,方便快捷。本试剂盒在分离(下层)胶缓冲液和浓缩(上层)胶缓冲液中已加入SDS,使用时不必额外加入。该试剂盒可配制30-50块常规大小的SDS-PAGE胶。

    注意事项

    1、10%APS用蒸馏水配置后放入1.5 ml离心管分装-20℃保存。APS溶液不稳定,用完后请立即放回冰箱低温冷冻,以免失效。若发现凝胶时间过长,请考虑更换10%APS溶液。

    2、SDS-PAGE凝胶聚合与时间和温度以及APS、TEMED的用量密切相关,其他条件不变的情况下可以调节APS、TEMED的用量来控制凝胶的速度,凝胶过快不利于操作。

    3、TEMED最后加入,即刻轻柔颠倒3-5次即刻,切忌强烈震荡而导致配置过程中气泡产生。TEMED易燃、有腐蚀性,请注意防护。

    4、本产品仅用于专业人员的科学研究用。

    5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

  • 组分说明

    货号 名称 规格 保存条件
    P001A1 30%Arc-Bis 100ml 4℃避光
    P001A2 分离胶缓冲液 70ml 室温
    P001A3 浓缩胶缓冲液 40ml 室温
    P001A4 过硫酸铵(APS) 0.5g 室温
    P001A5 TEMED 0.6ml 室温避光

    试验步骤

    1、根据目的蛋白的分子量大小选择合适的SDS-PAGE分离(下层)胶浓度,最佳浓度请参考附表1。

    2、制备分离(下层)胶各试剂使用量请参考附表2,各个试剂按顺序加到15或50 ml的离心管中,轻柔颠倒3-5次混合后倒胶、水封,一般20-30分钟后凝胶完全聚合。

    3、移去分离胶上的水封层,制备浓缩(上层)胶各试剂使用量请参考附表2。同样,各个试剂按顺序加到15或50 ml的离心管中,轻柔颠倒3-5次混合后倒胶、跟着快速地将梳子插入上层胶内,避免产生气泡,等待约20分钟凝胶完全聚合。

    5、凝胶聚合后,小心拔出梳子,以免破坏加样孔。

    6、进行常规电泳操作

  • 附表1 分离(下层)胶制备浓度与分离的蛋白分子量间的关系

    SDS-PAGE分离胶(下层胶)浓度 最佳分离范围
    8%胶 30-90kD
    10%胶 20-80kD
    12%胶 12-60kD
    15%胶 10-40kD

    附表2 制备分离(下层)胶和浓缩(上层)胶各试剂用量一览表

    分离(下层)胶 8% 10% 12% 15% 浓缩(上层)胶
    蒸馏水 2.4 ml 2.0ml 1.7ml 1.2ml 蒸馏水 1.8ml
    分离胶缓冲液 1.25ml 1.25ml 1.25ml 1.25ml 浓缩胶缓冲液 0.75ml
    30%Arc-Bis 1.25 ml 1.66 ml 2.0 ml 2.5 ml 30%Arc-Bis 0.4 ml
    10%APS 50 μl 50 μl 50 μl 50 μl 10%APS 15 μl
    TEMED 5μl 5μl 5μl 5μl TEMED 5μl