产品说明：

LipoJet^TM是一种新型的氟化阳离子脂质体转染试剂，细胞培养液中的血清和抗生素不影响转染。LipoJet^TM能够有效的将质粒DNA或是siRNA传递到常见的哺乳动物细胞中。LipoJet^TM具有高的转染效率和低细胞毒性的特点。

一、质粒DNA转染步骤

1、1X转染缓冲工作液的配制 将5X转染缓冲液用无菌ddH2O配制成1X转染缓冲工作液；1X转染缓存工作液常温保存24月有效。

注意：如果将LipoJetTM转染缓冲液（5X）保存于4ºC，可能会有白色沉淀出现，但并不影响转染效率。当配制成1X转染缓冲工作液，白色沉淀消失。

2、转染前一天（18h~24h）将细胞接种于六孔板，使第二天转染时细胞达到60%~70%满。

注意：此例以六孔板为例，对于其他类型的细胞培养板/皿，请参考表1。

3、转染前30~60 min，去除原培养液，换新鲜完全培养液（含血清和抗生素）。

4、对于每一个孔，取2ug质粒DNA加入200ul转染缓冲工作液（1X），涡旋混匀。

5、将6ul LipoJetTM转染试剂加入步骤4中溶液，涡旋混匀。

特别说明：对于不同类型的细胞，LipoJetTM：DNA可在1：1到3：1之间变化，一般使用3：1。

6、LipoJetTM/DNA混合物室温放置10min。

注意：室温放置最长时间不要超过20min。

7、将LipoJetTM/DNA混合物逐滴加入到六孔板中的一个孔中，轻轻晃动混匀。放入培养箱。

8、转染后24h~48h检测转染效率（将转染试剂加入到孔中时间记为0h）。

二、siRNA转染步骤

1、1X转染缓冲工作液的配制 将5X转染缓冲液用无菌ddH2O配制成1X转染缓冲工作液；1X转染缓存工作液常温保存24月有效。

注意：如果将LipoJetTM转染缓冲液（5X）保存于4ºC，可能会有白色沉淀出现，但并不影响转染效率。当配制成1X转染缓冲工作液，白色沉淀消失。

2、转染前一天（18h~24h）将细胞接种于六孔板，使第二天转染时细胞达到50%满。

注意：此例以六孔板为例，对于其他类型的细胞培养板/皿，请参考表2。

3、转染前30~60 min，去除原培养液，换新鲜完全培养液（含血清和抗生素）。

4、对于每一个孔，将20~160 pmoles siRNA（终浓度10~80nM）加入200ul转染缓冲工作液（1X），轻轻混匀。

5、将6ul LipoJetTM转染试剂加入步骤4中溶液，涡旋混匀。

6、LipoJetTM/siRNA混合物室温放置10min。

注意：室温放置最长时间不要超过20min。

7、将LipoJetTM/siRNA混合物逐滴加入到六孔板中的一个孔中，轻轻晃动混匀。放入培养箱。

8、转染后24h~72h检测siRNA沉默效率（将转染试剂加入到孔中时间记为0h），通常转染48h~72h后会有比较好的沉默效果。